一、释义

将菌种接种至一新鲜培养基上,每萌发一次即称为一代,因此,当原始菌种复溶并转至新培养基內生长,即认为已传代一次,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代,冷冻干燥的原始菌种转种后为第1代。菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起)不得超过5代。标准菌的复苏为传第一代,复壮为第二代。传第三代时取1支冻存管自然解冻,将其转接斜面菌种作为工作用菌种。此时,工作用菌种为第3代。

菌种保藏中心的菌种冻干粉为第0代

标准菌种的复苏为第1代 

复苏后经斜面复壮后为2代

二、操作步骤

（一）定期传代用菌的传代(斜面接种法)

传代菌种斜面

1.从冰箱冷藏室中取岀菌种斜面后,应在室温放置约30分钟。将装有新鲜配制的培养基菌种保藏管管壁上注明菌名及接种日期,和传代菌种一并移入洁净工作台,打开紫外灯照射一小时。关闭紫外灯。

2.点燃酒精灯,左手握住菌种斜面,将管口靠近火焰上方,右手拿接种棒后端,将接种环烧红约30秒,随后将接种棒金属部分在火焰上烧灼,往返通过三次。右手用无名指、小指及掌部夹住管塞,左手将管口在火焰上旋转烧灼,右手再轻轻拔开管塞,将接种环伸入管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下,稍冷后再至菌苔上,刮取少量菌苔,随即取出接种棒并将菌种管口移至火焰上方，塞上管塞，左手将菌种管放下。

3.取营养琼脂斜面(或改良马丁琼脂斜面)一支,照上述操作打开管塞,将接种环伸入管内至琼脂斜面的底部向上划一条直线,然后从底部向上作连续曲线划线,一直划到斜面顶端,使细菌接种在斜面的表面上。取岀接种环,在火焰上方将培养基管盖上塞子,然后将接种过细菌的接种环在火焰上烧灼灭菌。

4.将已接种好的细菌管置36℃±1℃细菌培养箱培养18~24h,真菌管置28℃±2℃真菌培养箱最多培养7天。

5.当工作用菌种传代代数小于5时,可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种,如(W3)可直接转接为(W4)。按上述程序操作,直至(W4)转为(W5)为止,需重新接种,旧的工作菌种及时进行销毁。

注:菌种斜面1次/周观察状态是否正常。